[611.018.7+611.611]-092.9

10.17238/issn2542-1298.2019.7.1.16

В.П. Пащенко*, Е.В. Тихонова*, А.Б. Гудков*/**
*Северный государственный медицинский университет (г. Архангельск)
**Северный (Арктический) федеральный университет имени М.В. Ломоносова (г. Архангельск)

Метод культивирования клеток и тканей in vitro широко используется для изучения структурных цитофизиологических свойств клеток организма. Перемещение фрагментов ткани в искусственные условия питательной среды позволяет оценить жизнеспособность тканей, способность клеток к регенерации и адаптации. В связи с этим в данной работе представлены результаты количественной оценки способности к росту in vitro фрагментов тканей почек, взятых у животных (мышей) различного возраста, при использовании метода множественных тканевых культур. Культивирование фрагментов тканей почек проводили в идентичных условиях, на поверхности перфорированных миллипоровых фильтров. Для однократной оценки роста культур использовали до 315 микрофрагментов ткани, что позволило более точно установить их количественные параметры. Оценку роста осуществляли путем фотометрирования с применением компьютерной программы ImageJ. Показано, что по мере старения происходит значительное уменьшение способности тканей к образованию растущих клеточных колоний и замедление их роста. Так, при сопоставлении тканей животных возрастом 30 и 140 дней количество выросших культур от более старых животных было меньше в 4,7 раза, а средняя площадь образовавшихся культур – в 1,8 раза; при сопоставлении культур тканей от животных возрастом 10 и 160 дней различие составляло в 15,7 и 4,3 раза соответственно. Проведенные исследования позволили уточнить выраженную зависимость роста эпителиальных клеток фрагментов тканей почек от возраста животных, проявляющуюся как в снижении образования количества культур, так и в задержке роста клеточной колонии.

рост тканей, культура тканей, регенерация, старение

1. Пол Д. Культура клеток и ткани. М.: Медгиз, 1963. 347 с.
2. Пинаев Г.П. Клеточные культуры в фундаментальных и прикладных исследованиях // Методы культивирования клеток. СПб.: Изд-во Политехн. ун-та, 2008. С. 7–22.
3. Крылова Т.А., Мусорина А.С., Зенин В.В., Кольцова А.М., Кропачева И.В., Турилова В.И., Яковлева Т.К., Полянская Г.Г. Получение и характеристика неиммортализованных клеточных линий дермальных фибробластов человека, выделенных из кожи век взрослых доноров разного возраста // Цитология. 2016. Т. 58, № 11. С. 850–864.
4. Hayflick L. The Limited in vitro Lifetime of Human Diploid Cell Strains // Exp. Cell Res. 1965. Vol. 37, № 3. Р. 614–636.
5. Спасокукоцкий Ю.А., Барченко Л.И. Влияние биологически активных веществ на процессы старения // Биология старения. Л.: Наука, 1982. C. 586–600.
6. Николенко Н.С. Стволовые клетки взрослого организма в культуре // Методы культивирования клеток. СПб.: Изд-во Политехн. ун-та, 2008. С. 188–201.
7. Пинаев Г.П. Проблемы и перспективы развития клеточных технологий // Клеточные технологии для регенеративной медицины. СПб.: Изд-во Политехн. ун-та, 2011. С. 8–24.
8. Кудрявцева М.В., Завадская Е.Э., Скорина А.Д., Смирнова С.А., Кудрявцев Б.Н. Метод получения изолированных клеток печени человека из материала прижизненных пункционных биопсий // Лаб. дело. 1983. № 9. С. 21–23.
9. Лопухин Ю.М., Коган Э.М. Критерии жизнеспособности органов и тканей перед трансплантацией. М.: Медицина, 1975. 280 с.
10. Хей Р. Сохранение и оценка качества клеток // Культура животных клеток: методы. М.: Мир, 1989. С. 108–165.
11. Устройство для посадки на подложку микрофрагментов биологических тканей: пат. СССР № 1785530, МПК С12М3/00 / В.П. Пащенко; заявитель и патентообладатель Арханг. гос. мед. ин-т. Заявка № 4898950 от 03.01.1991, опубл. 30.12.1992.
12. Schneider C.A., Rasband W.S., Eliceiri K.W. NIH Image to ImageJ: 25 Years of Image Analysis // Nat. Methods. 2012. Vol. 9, № 7. Р. 671–675.
13. Noursadeghi M., Tsang J., Haustein T., Miller R.F., Chain B.M., Katz D.R. Quantitative Imaging Assay for NF-κB Nuclear Translocation in Primary Human Macrophages // J. Immunol. Methods. 2008. Vol. 329, № 1-2. Р. 194–200. DOI: 10.1016/j.jim.2007.10.015
14. Новое в учении о регенерации / под ред. Л.Д. Лиознера. М.: Медицина, 1977. 358 с.
15. Пащенко В.П., Балашов В.К., Сивков А.Н., Пащенко А.В. Использование метода тканевых культур для оценки качества питьевой воды // Экология человека. 2003. № 3. С. 27–29.
16. Пащенко В.П., Гудков А.Б. Влияние питьевой воды «Акварель» на клетки ткани почек при культивировании in vitro // Экология человека. 2006. № 4 (прил. 2). С. 396.
17. Залкинд С.Я. Динамика цитологических изменений культивируемых вне организма клеток в норме и патологии // Вопросы цитологии, гистологии и эмбриологии. Рига, 1960. С. 15–20.
18. Залкинд С.Я., Цыпкин Л.Б. Некоторые вопросы дифференцировки и адаптации в клеточных культурах // Цитология. 1971. Т. 13, № 5. С. 547–563.
19. Онищенко Н.А. Клеточные технологии и современная медицина // Патол. физиология и эксперим. терапия. 2004. № 4. С. 2–11.